カエルの話
2016年08月22日
ホリデー前
というか結婚前なワケだが。先週の木曜日にいい卵がゲットできなかったので、今日は何もすることない。でも学生の指導(3人)があるので、ラボにはいなくてはならない。明日カエルがいい卵産んだら、今週中に2次抗体までいって、一週間ホリデー中にwashのまま放置できるかなー?多分できると思うけど。Murrayに入れたまま放置でも蛍光シグナル安定してるよね〜。問題はサンプル数の多さだな。35サンプル一度にできるかなー、いやしなければ。
今週は木曜日にレジスターオフィスで結婚式予定。イギリスでは日本と違って、入籍と式を別々にできない。しかもその資格がある人の前での入籍になるので、いつでもどこでも、というわけにはいきません。あと証人もいるんですわ。面倒ー。しかも私が頼んでた学生さんは中国に帰っちゃって、結局証人二人ともスティーブンの友達になりました。
というわけで、カエル学会最中はクレタ島にいるけど、学会には出ません(w 一応ハネムーンですから。
今週は木曜日にレジスターオフィスで結婚式予定。イギリスでは日本と違って、入籍と式を別々にできない。しかもその資格がある人の前での入籍になるので、いつでもどこでも、というわけにはいきません。あと証人もいるんですわ。面倒ー。しかも私が頼んでた学生さんは中国に帰っちゃって、結局証人二人ともスティーブンの友達になりました。
というわけで、カエル学会最中はクレタ島にいるけど、学会には出ません(w 一応ハネムーンですから。
2016年07月15日
ポリA
朝6時に来て実験やったのに、全然動いてる気配がない。まずインジェクションしたコンストラクトの発現が見られず。共同研究者から送られてきたプラスミドマップを見ると、発現してほしい遺伝子のORFの下流にポリAサイトが無い、、、、。これはどうしたものでしょう。共同研究者に指摘するも、自分はGFPの発現を見たと言い張る。もう一度だめもとでインジェクションしてみるけど。。つーか今までに使ったことの無いプロモーターとかコンストラクトを使うときは、きちんと発現を確認してから実験すべきだろうに。すでに発現するという前提で、そのために起こる遺伝子発現の変化を見るのを苦労してるらしいけど(だからうちに共同研究が来た)、そりゃ当たり前じゃん。発現してないんだもの。
とりあえずシステム自体 (CRISPRi) は何かに役に立ちそうなので、pCS2にサブクローニング中。きちんとポリAつけるのとRNA合成のため。 今の所全然使う予定ないけど。
それにしてもこういう知識って、どうやって習うものなのだろう?普通に教科書の知識としてpolyAの重要性を習う。でもってカエルラボにいると、発現ベクターのpolyAの前にクローニングサイトがあるので、なんとなくそこでわかったのかなー、私??スペイン人ポスドクが分子生物学を習いたい、というが、基礎知識もなくて困る。SP6キットでのRNA合成すらできない。普通にundergradでもできるのになぁ。何を教えるべきなのかわからない。
とりあえずシステム自体 (CRISPRi) は何かに役に立ちそうなので、pCS2にサブクローニング中。きちんとポリAつけるのとRNA合成のため。 今の所全然使う予定ないけど。
それにしてもこういう知識って、どうやって習うものなのだろう?普通に教科書の知識としてpolyAの重要性を習う。でもってカエルラボにいると、発現ベクターのpolyAの前にクローニングサイトがあるので、なんとなくそこでわかったのかなー、私??スペイン人ポスドクが分子生物学を習いたい、というが、基礎知識もなくて困る。SP6キットでのRNA合成すらできない。普通にundergradでもできるのになぁ。何を教えるべきなのかわからない。
2016年07月08日
寝坊
木曜日の朝、寝坊した。いつもは5時半に起きるところを、目が覚めたら6時20分!弁当を作らず、朝食時間も短縮したら、なんとか10分遅れで家を出れた。やはりtropの実験をすると疲れが、、、w
今週の火曜日は、ちょっと早めに起きて (5時20分)朝ごはん用のトーストを作って弁当箱に入れて、身支度だけしてラボへ。6時にカエ注。カエルが卵を産むまで、yueの実験の追試のためのレービスの受精させて朝食。そのサンプルを固定しつつ、hyperトランスジェニック胚の実験を仕込み、9時半に卵を産み始めたので人工受精させて100個ほどインジェクション。その後昼過ぎまでhyperイメージング。合間15分の昼食とって、イメージングが終わったら、午前中にfixしておいた胚の膜取り。ブロッキングして一次抗体投入してO/N。それが終わってから、 trop胚が原超貫入始めるまで、ひたすらhyperイメージの解析。とりあえずいい結果だったので、疲れも吹き飛ぶ。5時すぎにtrop胚にShiled1投入して終わり〜。
さて今日やっと免疫染色終わります。蛍光免染なんて、大学院時代以来だー!当時はcyシリーズが発売されたばかりだったなー。その時は切片でしたが。ホールマウントはひたすら時間がかかる。
今週の火曜日は、ちょっと早めに起きて (5時20分)朝ごはん用のトーストを作って弁当箱に入れて、身支度だけしてラボへ。6時にカエ注。カエルが卵を産むまで、yueの実験の追試のためのレービスの受精させて朝食。そのサンプルを固定しつつ、hyperトランスジェニック胚の実験を仕込み、9時半に卵を産み始めたので人工受精させて100個ほどインジェクション。その後昼過ぎまでhyperイメージング。合間15分の昼食とって、イメージングが終わったら、午前中にfixしておいた胚の膜取り。ブロッキングして一次抗体投入してO/N。それが終わってから、 trop胚が原超貫入始めるまで、ひたすらhyperイメージの解析。とりあえずいい結果だったので、疲れも吹き飛ぶ。5時すぎにtrop胚にShiled1投入して終わり〜。
さて今日やっと免疫染色終わります。蛍光免染なんて、大学院時代以来だー!当時はcyシリーズが発売されたばかりだったなー。その時は切片でしたが。ホールマウントはひたすら時間がかかる。
2016年06月29日
よく寝れた
昨晩はやはり緊張して疲れていたのか、久しぶりに一度も目が覚めずに爆睡。ナンシーにはWell doneと言われたが、自分的には80点かなー。時期もあってかいつも来るPIメンバーがほとんどいなかったが、一個かなり鋭い質問がきて、頑張って答えていたんですがエンリケが横から、彼が聞いているのはそんな意味じゃない!こうこういう質問だ!って言い出して、でもエンリケがそうでしょ?と質問者に聞いたら、違う、って言われてました(苦笑)。エンリケの悪いところは、演者に答えさせない。しかも私の時に多いなー。過保護なのか、信用がないのか、、、orz しかし私も今回はしっかり覚えたはずなのに、聴衆を目の前にするとアドリブが入りまくって集取がつかなくなる、、、。しかしこの質問のおかげで(?)、論文投稿がまた伸びそう、,、orz 就活中のYueが私のトークを見るために久しぶりに来ていたので3人で話したが、全然危機感なし。あんた、論文がないとポスドクとして就職できないのに、、
2016年06月11日
ボスは詩人
すみません。またインド人の愚痴です。。
私は何でも気付いちゃうからいけないんだろうなー。こっちの精神に悪いので気にしたくないのだが、私の観察力がありすぎて気付いてしまう。一昨日の朝、彼のベンチの上にダイアモンドが先っちょに付いた、ガラスカッターが置いてあった。インジェクション部屋の入り口のところに取り付けてある14mlのファルコンチューブにいつもは収められている。私が元の位置へ戻そうかとも思ったが、彼に任せよう、とそのままにした。翌朝ラボで行ったり来たりしていると、スペイン人ポスドクのベンチの横にあるガラクタ(前の中国人学生が、チップの箱にペン類やら小物を入れていたやつ)に混ざって、ガラスカッター発見!なぜこんなところに!?一応スペイン人ポスドクに、最近使ったかどうか聞いたところ、使ってないよ、インジェクション部屋にあるやつでしょ?というので、やはりインド人かと彼にエンリケへのCC付きでメールを送った(だってもう朝の10時なのに、奴はラボにいない)。
私:使った後は、ちゃんと元の場所に戻してね。あなたが使った後、今朝変な場所で見つけたよ。
彼:インジェクション部屋の入り口のグラスカッターを取って使った。グラスカッターにプロジェクトライセンスの書類がかかっていたので、それを壊れたボールペンに置き換えて書類をかけた。グラスカッターの元の保管場所がわからなかったので、文房具入れに入れた。
なぜ、そうなる。たぶん彼以外の全員が、ガラスカッターはインジェクション部屋入り口にあることを知っている。なぜ元の場所に戻さないのか。さらに、わからないのなら誰かに聞くべきで、勝手に自分の好きなところに置くべきではないだろう。
エンリケからの彼の答えに対する返事がすごい詩人。
Where you found it, on the wall propping up the PPL, is where it belongs. The diamond glass cutter has called that its home for the past ten years.
今週からトルコからundergradが来ていて、8月まで滞在予定。すごいやる気満々なので、こちらも忙しい。金曜日に一度教えたタイムラプスをさせつつ私は自分の実験をしていたのですが、その時に使い方がわからなくなってインド人に聞いたようです。ところがインド人も自分がわかってないのをわからずに教えようとするから、もうmess。で、インド人が私のところに、私が学生さんの前に撮った映像を保存すべきかどうか聞いてきたので発覚。わざわざ保存しなくても問題は解決できるはずなのに、なぜ?ちょうど自分の仕事が終わったので、私が面倒を見るとインド人にストップかけて顕微鏡室に行った。インド人はホワイトバランスがどうのこうの自分の設定を呼び出したの云々言っていたが、問題は単純で、フォーカスが合ってないだけでした。私が速攻で解決。顕微鏡室に行って、私はインド人を追い出そうとしたのですが彼が見たいというのでそのままで、トルコのお兄ちゃんにどうしたの?と聞いて、話しているとインド人が横から何か言ってくる。もう一度出て行けと言ったのに、彼は見てるだけという。いや、あんた横からどうでもいいこと言ったし。でもさすがに私が速攻で問題を解決したら、黙った。
私は何でも気付いちゃうからいけないんだろうなー。こっちの精神に悪いので気にしたくないのだが、私の観察力がありすぎて気付いてしまう。一昨日の朝、彼のベンチの上にダイアモンドが先っちょに付いた、ガラスカッターが置いてあった。インジェクション部屋の入り口のところに取り付けてある14mlのファルコンチューブにいつもは収められている。私が元の位置へ戻そうかとも思ったが、彼に任せよう、とそのままにした。翌朝ラボで行ったり来たりしていると、スペイン人ポスドクのベンチの横にあるガラクタ(前の中国人学生が、チップの箱にペン類やら小物を入れていたやつ)に混ざって、ガラスカッター発見!なぜこんなところに!?一応スペイン人ポスドクに、最近使ったかどうか聞いたところ、使ってないよ、インジェクション部屋にあるやつでしょ?というので、やはりインド人かと彼にエンリケへのCC付きでメールを送った(だってもう朝の10時なのに、奴はラボにいない)。
私:使った後は、ちゃんと元の場所に戻してね。あなたが使った後、今朝変な場所で見つけたよ。
彼:インジェクション部屋の入り口のグラスカッターを取って使った。グラスカッターにプロジェクトライセンスの書類がかかっていたので、それを壊れたボールペンに置き換えて書類をかけた。グラスカッターの元の保管場所がわからなかったので、文房具入れに入れた。
なぜ、そうなる。たぶん彼以外の全員が、ガラスカッターはインジェクション部屋入り口にあることを知っている。なぜ元の場所に戻さないのか。さらに、わからないのなら誰かに聞くべきで、勝手に自分の好きなところに置くべきではないだろう。
エンリケからの彼の答えに対する返事がすごい詩人。
Where you found it, on the wall propping up the PPL, is where it belongs. The diamond glass cutter has called that its home for the past ten years.
今週からトルコからundergradが来ていて、8月まで滞在予定。すごいやる気満々なので、こちらも忙しい。金曜日に一度教えたタイムラプスをさせつつ私は自分の実験をしていたのですが、その時に使い方がわからなくなってインド人に聞いたようです。ところがインド人も自分がわかってないのをわからずに教えようとするから、もうmess。で、インド人が私のところに、私が学生さんの前に撮った映像を保存すべきかどうか聞いてきたので発覚。わざわざ保存しなくても問題は解決できるはずなのに、なぜ?ちょうど自分の仕事が終わったので、私が面倒を見るとインド人にストップかけて顕微鏡室に行った。インド人はホワイトバランスがどうのこうの自分の設定を呼び出したの云々言っていたが、問題は単純で、フォーカスが合ってないだけでした。私が速攻で解決。顕微鏡室に行って、私はインド人を追い出そうとしたのですが彼が見たいというのでそのままで、トルコのお兄ちゃんにどうしたの?と聞いて、話しているとインド人が横から何か言ってくる。もう一度出て行けと言ったのに、彼は見てるだけという。いや、あんた横からどうでもいいこと言ったし。でもさすがに私が速攻で問題を解決したら、黙った。